Kidney Int ：肾小管生物钟缓冲功能障碍导致糖尿病患者肾糖异生增强和加重高血糖

或多或少及目的：在乳癌患者中会，消化道通过增高原尿中会的重吸收和上调近端腹腔中会的糖酵解来促进乳癌高高血压的时有发生。然而，高血压素质的慢性升高意味著反过来导致乳癌大肠病(DN)，这是乳癌最严重的并发症之一，其特点是大肠小球、钾离子和消化道血管受损。虽然细胞内持续性是乳癌大肠病时有发生和发展的主要因素，但在大多数乳癌患者中会，高高血压本身并不会导致大肠功能不全。这断定，合并症或生存环境、遗传或表征遗传的波一气意味著是启一气和/或加速令人满意DN所所需的。昼夜节律是一种特别是在的分子计时器机制，它将肝细胞、组织和的系统的生物功能与24全程的生存环境周期互联。暂时性昼夜节律驱一气肝细胞类型和组织特有的节律，它们的失调与一系列结核病的发病和/或令人满意有关。然而，乳癌患者消化道中会内在昼夜节律的生理反应生理反应作用仍不清楚。

方法：为了解决这个问题，我们用链脲中村抗病毒可借了足肝细胞(cKOp果蝇)或钾离子(cKOt果蝇)中会缺乏灵长类一气物基因表达通气因子BMAL1的果蝇患I型乳癌。

果蝇三维制备：8周龄Bmal1lox/lox/Nphs2-RTTA/LC1果蝇(cKOp果蝇)或8周龄Bmal1lox/lox/Pax8-RTTA/LC1果蝇(cKOt果蝇)经DOX(饮水中会2 mg/ml)处理2周后，Bmal1(ARNTL)基因失活。他们的实验组(Bmal1lox/lox果蝇)不感兴趣相同的DOX治疗。在DOX治疗结束一周后，通过腹腔麻醉链脲中村抗病毒(STZ，50 mg/kgBMI，每日5天)可借I型乳癌。溶媒处理的果蝇不感兴趣PBS的溶媒麻醉。所有实验均在最后一次麻醉STZ或溶媒8周后透过。在所有实验中会，从ZT9处死的果蝇身上收集组织和肝脏(ZT-Zeitgeber时间的单位；ZT0是开灯时间，ZT12是关灯时间)。

细胞内膨大：果蝇被饲养在个体细胞内膨大子中会(Tecniplast，意大利)。在4天的适应期后透过24全程的血浆收集。

血浆和血浆克隆校准：用Vaudois中会心医院临床实验室(LCC)校准尿和血浆Na+、K+、Ca2+、Mg2+、磷酸盐、肌酐、、痛风和尿素沸点及微血管。用酸碱郭子(Metrohm)校准血浆pH值。用作EPOC肝脏深入研究郭子(西门子医疗)校准一气-微血管混合血的肝脏pH值和血气。尿铵校准用作Berthelot法。尿可滴定酸校准用作Chan25方法。用作放射免疫法(DPC)校准血浆醛固酮素质。用Mercodia的公司的试剂盒校准血浆血糖。

耐量试验车(GTT)：禁欲15全程后，给空白实验组和cKOt果蝇腹腔麻醉(1g/kgBMI)。分别于麻醉前(t=0)、麻醉后15、30、60、90、120、180min，用高血压读数郭子校准高血压。

血糖耐量试验车(ITT)：禁欲4h后，给实验组和cKOt果蝇腹腔麻醉0.5U/kgBMI的重组人血糖(人重组血糖，Sigma)。分别于血糖麻醉前(t=0)、血糖麻醉后15、30、45、60、90、120、150、180min校准高血压。如果高血压调低2 mm以下，则通过腹腔麻醉30毫克拯救果蝇，并将其排除在深入研究之外。

RNA测序高效率：RNA-SEQ按照Ansermet等人在6.Mus Musculus中会的描述透过。用作GRCm38.92基因注释。用作TMM归一化对基因计数器透过定标，并用作LIMMA R包27中会的“CPM”表达式将其正弦转换为每百万计数器(CPM)。算出了KO和Ctrl一气物在未处理(PBS)和处理(STZ)状况下的差异表述以及彼此之间的相互作用。对于这三种来得中会的每一种，选择FDR

结果：在患有乳癌的cKOp和cKOt果蝇中会，昼夜节律功能障碍与乳癌大肠病的时有发生没有相关性。然而，与链脲中村抗病毒治疗的实验组来得，患有乳癌的cKOt果蝇表现出加高高血压渐增，尿中会消化增高，多尿增高，消化道肥大更明显。mRNA和蛋白质表述深入研究显示，与乳癌实验组果蝇来得，cKOt乳癌果蝇消化道中会的糖酵解除此以外显著提高。CKOt乳癌果蝇的基因表达深入研究和功能深入研究确定了直接或间接影响糖酵解除此以外的多种机制的波一气。

论据：我们证明了内在钾离子昼夜节律功能障碍可通过提高大肠近端腹腔的糖酵解而渐增乳癌高高血压，进一步务实了昼夜节律通气在乳癌患者中会的重要性。

原文出处：

Ansermet C， Centeno G， Bignon Y，et al.Dysfunction of the circadian clock in the kidney tubule leads to enhanced kidney gluconeogenesis and exacerbated hyperglycemia in diabetes.Kidney Int 2021 Nov 24